Вы находитесь:

Обзор методов концентрирования и очистки при производстве вакцин: хроматография

Хроматография в различных модификациях по используемому наполнителю колонок применяется для очистки вирусного компонента вакцины и его частичного концентрирования.

Адсорбционная хроматография заключается в пропускании через колонну вирусной суспензии, после чего колонна промывается чистым буфером, чтобы избавиться от загрязнений. Элюция вирусов с колонны осуществляется в малый объем специально выбранным элюирующим раствором. Преимущества метода: высокая эффективность; возможность автоматизации и получения объективной информации; сочетание с другими физико-химическими методами; широкий интервал концентраций соединений; возможность изучения физико-химических свойств соединений; осуществление проведения качественного и количественного анализа; применение для контроля и автоматического регулирования технологических процессов.
 
Мембранная абсорбционная хроматография. Технологический процесс крупномасштабной ионообменной мембранной абсорбционной хроматографии может быть представлен различными современными промышленными системами. Мембранные хроматографические платформы могут применяться для очистки биомолекул в фармацевтики и биотехнологической индустрии. Технология объединяет преимущества обычных хроматографических колонок в степени разделения и способности мембранной технологии относительно перемещения массы, высокой пропускной способности и надежности. Мембранная абсорбция используется, например, для очистки терапевтических белков, антител, вирусов, ДНК, олигонуклеотидов и факторов свертывания крови.
 
Система многоразового использования состоит:

 Рисунок 2 - Устройство мембранной хроматографии
 
Система проста в монтаже; имеет высокую химическую стабильность (санитарно-гигиеническая обработка в однонормальным NaOH, хранение в 20% этаноле, закрепленным буфером);  имеет достаточную устойчивость (отсутствуют проблемы с доступом воздуха, проводящим каналом или разрушением корпуса); размер пор мембраны >3 μm позволяет разделять большие молекулы и даже вирусы; не продолжительный временной диапазон - в 20–100 раз быстрее, чем обычные колонки с такой же емкостью; снижение времени цикла приводит к уменьшению потерь продукта; многократное использование; валидация и экстрагируемая доступность; масштабируемость.

Гельхроматография заключается в пропускании суспензии через колонку, заполненную пористым материалом. Вирусы проходят через колонку без задержки, а примеси задерживаются. Для заполнения колонны применяется макропористое стекло с диаметром пор порядка 100 нм, с удельной поверхностью 10-25 м2/г. Далее колонну промывают буфером. Это обстоятельство вытекает из принципа гельхроматографии. Ведь зона вирусов и зона примесей движутся с несколько различными скоростями. Отношение этих скоростей равно отношению свободного объема колонны между зернами к свободному объему, включая поры. Это отношение обычно порядка ½ и для того, чтобы зоны разделились, нужно предоставить им свободное пространство. Характеристика метода: отсутствует концентрирование, происходит разбавление суспензии в 2-3 раза; имеет значение только размер частиц; поглощение вирусов поверхностью является нежелательным, вредным побочным эффектом; слабое использование объема колонны, так как при гельхроматографическом процессе вирусной суспензией заполняют всего лишь 10-20% от объема колонны.

Вернуться »

Abercade — Исследования промышленных рынковBiOENGiNEERiNGТРИС